1.实验原理斑马鱼软骨及尾鳍损伤后可完整再生,修复通路、胶原调控基因与人类皮肤、结缔组织高度同源;切断尾鳍构建组织损伤模型,创面炎症会抑制芽基细胞增殖,延缓修复
联系我们1.实验原理
斑马鱼软骨及尾鳍损伤后可完整再生,修复通路、胶原调控基因与人类皮肤、结缔组织高度同源;切断尾鳍构建组织损伤模型,创面炎症会抑制芽基细胞增殖,延缓修复。I 型胶原蛋白可上调胶原合成基因col1a1b,促进成纤维细胞增殖与细胞外基质沉积,同时抑制中性粒细胞聚集、减轻创面炎症,双重加速组织修复。幼鱼通体透明,可直观定量再生面积;MPX 荧光转基因品系可直接计数中性粒细胞评价炎症水平。
2.检测指标
(1)软骨修复:软骨荧光斑马鱼统计其软骨荧光强度
(2)尾鳍再生面积:显微镜拍照 + Image J 软件定量像素,计算再生效率;
(3)炎症水平:MPX/LYZ 荧光斑马鱼统计区域内中性粒细胞数量。
(4)胶原再生基因:q-PCR 检测col1a1b mRNA 相对表达量(β-actin 为内参);
3.实验结果
有效受试物处理后,与损伤模型组对比,受试物处理组尾鳍再生面积显著增大,col1a1b基因表达上调,创面中性粒细胞数量明显减少;说明受试物可促进胶原合成、抑制损伤炎症,兼具促组织再生与抗炎活性。
4.阳性对照药
重组人表皮生长因子(rh‑EGF)/尿囊素(Allantoin)

图1. 软骨修复

图2. 中性粒细胞

图3. 基因mRNA 相对表达量
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