实验原理斑马鱼幼鱼肝脏结构、脂质代谢通路以及乙醇代谢通路与人类高度同源一致,采用乙醇溶液浸泡幼鱼构建酒精性脂肪肝体内模型,模拟人体长期饮酒后肝脏脂质堆积、肝细胞
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斑马鱼幼鱼肝脏结构、脂质代谢通路以及乙醇代谢通路与人类高度同源一致,采用乙醇溶液浸泡幼鱼构建酒精性脂肪肝体内模型,模拟人体长期饮酒后肝脏脂质堆积、肝细胞炎性损伤与肝组织肿大病变。斑马鱼幼鱼通体透明,无需解剖即可在显微镜下直接活体观察肝脏形态大小与脂滴蓄积情况,是快速筛选具备解酒护肝、改善酒精性肝损伤活性受试物的经典体内动物模型。
检测指标
1.肝荧光转基因斑马鱼肝脏相对面积、荧光积分光密度
2.生化试剂盒检测谷丙转氨酶 ALT、谷草转氨酶 AST 肝损伤酶活力
实验结果
正常对照组斑马鱼肝脏形态规整,无明显脂滴沉积,肝功能酶与相关基因维持基础表达水平;酒精模型对照组肝脏显著肿大变形,肝细胞内大量脂质空泡堆积,ALT、AST 酶活性显著升高,CYP2E1、SCD1、Caspase3 基因表达大幅上调,PPARα 表达被明显抑制。阳性对照与受试样品干预后,肝脏肿胀与脂质浸润情况得到显著缓解,肝损伤酶活力明显回落,有效抑制酒精毒性代谢基因、促脂合成及促凋亡基因表达,上调肝脏脂质分解相关基因,证明该样品能够有效干预乙醇诱导的酒精性脂肪肝,发挥肝脏保护作用。
阳性对照药
水飞蓟宾

图1.肝脏面积与肝脏荧光强度

图2.谷丙转氨酶ALT活力
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