实验原理:
炎症是免疫系统对组织损伤和感染的一种反应,主要特点就是白细胞(中性粒细胞、巨噬细胞)会聚集在感染组织周围。斑马鱼的免疫系统非常类似于哺乳动物。创伤发生时,中性粒细胞、巨噬细胞对创伤性炎症几乎同时作出应答,中性粒细胞迁移速度快,先募集到损伤部位处,随后巨噬细胞才到达。数小时后,炎症开始消退,巨噬细胞和中性粒细胞离开损伤部位。斑马鱼鱼鳔(swim bladder)进化同源对应哺乳动物肺,具备气道腔室、上皮屏障、局部免疫微环境,细菌 / 内毒素定向侵染鱼鳔可精准模拟细菌性肺炎:气道损伤、肺泡炎症、中性粒细胞浸润等。内毒素(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分,我们将其处理斑马鱼,诱导炎症介质的产生。采用转基因中性粒细胞荧光鱼(呈绿色),可在荧光显微镜在观察到斑马鱼中性粒细胞的聚集、分布情况。
检测指标:(1)中性粒细胞数量 (2)炎症因子mRNA表达水平,如IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10等
实验结果:外周循环中性粒细胞穿透血管壁,定向迁移、大量涌入鱼鳔腔,鱼鳔中性粒细胞数量显著增多。
造模药常用:LPS

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